产品名称：

Cas13a核酸酶

产品介绍：

LbuCas13a核酸酶是一种来自Leptotrichia buccalis细菌的RNA介导内切酶。Cas13a属于2

类VI型CRISPR-Cas系统，包含一个具有两个HEPN结构域的单一蛋白效应体。Cas13a表现出

两种不同的核糖核酸酶活性。Cas13a在体外和体内均具有序列特异性RNA切割活性。与

target RNA的结合会使LbuCas13a两个HEPN结构域发生构象变化，激发LbuCas13a非特异性

地切割临近的任意单链RNA。Cas13a的两种不同的核糖核酸酶活性使引导RNA加工和RNA

检测成为可能。以Cas13a-crRNA复合物和猝灭的荧光ssRNA为报告基因的RNA检测方法具

有多用途、快速和高特异性的特点。

来源：

大肠杆菌表达的重组Cas13a

浓度：

4毫克/毫升

分子量：

在非还原条件下，在SDS-PAGE上约180kDa

储存缓冲液：

20 mM HEPES-K, 200 mM KCl, 10% 甘油, 1 mM TCEP，pH 7.0储存和稳定性：

自制造之日起，长期存储建议-80℃，短期使用存储可-20℃，避免反复冻融循环；干冰

运输；

应用方向：

crRNA依赖性RNA切割

产品组分：

Cas13a Nuclease

100ul

500ul

Cas13a Nuclease Reaction Buffer(1X)

5ml

5ml X 5

质量控制规范：

Assay

Specifications

Appearance

Clear, colorless liquid

Purity by SDS-PAGE

≥ 90%

Activity

≥ 85% by in vitro digestion of ssRNA

Concentration

4 mg/ml±10% as analyzed by A280

注意事项：

1.实验中请保持实验区环境整洁，操作时需穿戴干净的手套、口罩，实验所用枪头、离心

管等耗材均为 Nuclease-free。

2.操作环境需定期使用RNA去污剂进行处理，避免气溶胶污染。

3.Cas13a对热敏感，应全程冰上配置体系，在使用后立即将其放置于-20°C 中保存，长时-

80°C保存。

实验示例：验证target RNA引发Cas13a的侧切活性。反应体系：

组分

体积（μL）

终浓度

RNP（2.85 μM）

1.75

100 nM

RNase inhibitor（40 units/mL）

1.25

1 unit/mL

Reporter RNA（20 μM）

1

400 nM

靶标RNA

1

根据实验要求设定

切割缓冲液

45

实验方法：

将Cas13a与crRNA按1:1的比例37℃混合15分钟，配制成终浓度为5 μM 的RNP复合物。

复合物用反应液稀释至100 nM，加入1U/mL的RNA酶抑制剂和400 nM reporter RNA（FAM

标记），1 μL target RNA激活Cas13a反应体系。荧光酶标仪设置激发光波长485 nm，发射光

波长520 nm，每5分钟检测荧光值（不同仪器检测基数会有差别，但数据趋势一致）。

实验观察加入target RNA后相较于未加入时，反应体系中检测到明显增强的荧光，证明

Cas13a体系的有效性。

本产品仅供科研使用。